細菌基因組完成圖真菌基因組完成圖微生物群落多樣性宏基因組測序服務全長轉錄組測序第三代測序服務非靶向代謝組學靶向代謝組學脂質組學離子組學脂肪酸檢測氨基酸檢測代謝組學服務定量蛋白質組服務雙向電泳服務修飾蛋白質組蛋白質芯片蛋白質譜鑒定蛋白互作檢測Western Blot蛋白質組學服務高通量測序數據分析蛋白質組學數據分析代謝組學數據分析芯片數據分析GO/Pathway富集分析相關性和聚類分析共表達網絡圖靶基因預測調控網絡圖蛋白相互作用網絡圖生物信息學服務CRISPR/Cas9載體構建穩定細胞系構建服務模式生物制備服務CRISPR/Cas9技術服務甲基化測序服務甲基化芯片服務甲基化驗證服務DNA甲基化服務lncRNA測序服務lncRNA芯片服務lncRNA定量PCR驗證lncRNA過表達服務lncRNA抑制服務lncRNA技術服務miRNA測序服務miRNA芯片服務miRNA定量PCR驗證miRNA過表達服務miRNA抑制服務miRNA靶基因驗證服務miRNA技術服務環狀RNA測序服務環狀RNA芯片服務環狀RNA定量PCR驗證環狀RNA過表達服務環狀RNA抑制服務環狀RNA技術服務轉錄組測序服務表達譜測序服務mRNA/lncRNA/環狀RNA 三合一芯片表達譜芯片服務熒光定量PCR驗證mRNA過表達服務mRNA抑制服務mRNA技術服務轉錄因子篩選服務抗體制備服務ChiP-Seq測序服務ChiP-qPCR技術服務EMSA技術服務luciferase 實驗服務轉錄因子技術服務mRNA定量PCR檢測miRNA定量PCR檢測lncRNA定量PCR檢測環狀RNA定量PCR檢測DNA拷貝數檢測相對定量PCR服務絕對定量PCR服務熒光定量PCR服務整體課題服務SNP分型檢測服務SSR/STR技術服務病毒包裝服務CRISPR/Cas9技術試劑miRNA功能研究試劑lncRNA功能研究試劑環狀RNA功能研究試劑mRNA功能研究試劑發表文獻樣品準備服務流程基金申請
luciferase實驗服務
服務詳情


  轉錄因子的DNA結合域和順式因子實現共價結合,從而對基因的表達起抑制或增強的作用。螢光素酶報告基因實驗(luciferase Assay)是檢測這類轉錄因子和其靶啟動子中的特異順序結合的重要手段,其原理簡述如下:

(1) 用靶啟動子的特定片段替換報告基因質粒(如pGL3-basic)的啟動子區;

(2) 將要檢測的轉錄因子表達質粒與報告基因質粒共轉。如果該轉錄因子能夠激活靶啟動子,則螢光素酶就會表達,且其表達量與轉錄因子的作用強度成正比;

(3) 加入特定的底物,螢光素酶與底物反應,產生螢光素,檢測熒光的強度可以對螢光素酶的活性定量,進而判斷該轉錄因子能否與靶啟動子片段發生作用及其作用強度。

螢光素酶報告基因實驗(luciferase)技術服務



服務內容

1、分析并預測啟動子區可能的轉錄因子結合位點。

2、構建含調控元件序列的熒光素梅報告基因載體。

3、篩選陽性克隆,測序。

4、擴增轉錄因子質粒,提純備用。同時準備相應的空載質粒對照,提純備用。

5、培養目的細胞,并接種于孔板中,使生長達到80%匯合度。

6、將報告基因質粒與轉錄因子表達質粒共轉染細胞。

7、提取蛋白并用于熒光素酶檢測。

8、加入底物,測定熒光素酶的活性。

9、計算相對熒光強度,并與空載對照比較。

10、實驗報告。


客戶只需提供轉錄因子和啟動子名稱或序列,我們提供整套實驗服務和結果報告。