細菌基因組完成圖真菌基因組完成圖微生物群落多樣性宏基因組測序服務全長轉錄組測序第三代測序服務非靶向代謝組學靶向代謝組學脂質組學離子組學脂肪酸檢測氨基酸檢測代謝組學服務定量蛋白質組服務雙向電泳服務修飾蛋白質組蛋白質芯片蛋白質譜鑒定蛋白互作檢測Western Blot蛋白質組學服務高通量測序數據分析蛋白質組學數據分析代謝組學數據分析芯片數據分析GO/Pathway富集分析相關性和聚類分析共表達網絡圖靶基因預測調控網絡圖蛋白相互作用網絡圖生物信息學服務CRISPR/Cas9載體構建穩定細胞系構建服務模式生物制備服務CRISPR/Cas9技術服務甲基化測序服務甲基化芯片服務甲基化驗證服務DNA甲基化服務lncRNA測序服務lncRNA芯片服務lncRNA定量PCR驗證lncRNA過表達服務lncRNA抑制服務lncRNA技術服務miRNA測序服務miRNA芯片服務miRNA定量PCR驗證miRNA過表達服務miRNA抑制服務miRNA靶基因驗證服務miRNA技術服務環狀RNA測序服務環狀RNA芯片服務環狀RNA定量PCR驗證環狀RNA過表達服務環狀RNA抑制服務環狀RNA技術服務轉錄組測序服務表達譜測序服務mRNA/lncRNA/環狀RNA 三合一芯片表達譜芯片服務熒光定量PCR驗證mRNA過表達服務mRNA抑制服務mRNA技術服務轉錄因子篩選服務抗體制備服務ChiP-Seq測序服務ChiP-qPCR技術服務EMSA技術服務luciferase 實驗服務轉錄因子技術服務mRNA定量PCR檢測miRNA定量PCR檢測lncRNA定量PCR檢測環狀RNA定量PCR檢測DNA拷貝數檢測相對定量PCR服務絕對定量PCR服務熒光定量PCR服務整體課題服務SNP分型檢測服務SSR/STR技術服務病毒包裝服務CRISPR/Cas9技術試劑miRNA功能研究試劑lncRNA功能研究試劑環狀RNA功能研究試劑mRNA功能研究試劑發表文獻樣品準備服務流程基金申請
模式動物制備服務
服務詳情

  簡介

      在Science2013年1,3月)的兩篇文章,證明Cas9系統能在293T、K562、iPS等多種細胞中,進行有效的靶向酶切,非同源重組(NHEJ)、同源重組 (HR)效率在3-25%之間,與TALEN酶切效果相當。文章還證明,多個靶點可以同時進行靶向酶切。這些工作將進一步靶向基因操縱推向高潮,使得多個基因敲除、敲入變得更為簡單、高效。雖然目前,大家對該技術的特異性,免疫原性還了解甚少,但是隨著研究的不斷深入,一定會有很大的改善。在未來的2-3年,動植物育種、干細胞定向分化、遺傳疾定點修復等等都將得到迅猛的發展。

  言行生物擁有成熟高效的CRISPR/Cas9及TALEN基因敲除技術平臺,完善的模式生物構建流程平臺,完美整從載體設計、構建、活性鑒定、基因突變動物模型建立等各個環節。現推出小鼠、大鼠、豬、斑馬魚等模式生物基因敲除/敲入技術服務,為客戶提供周期短、性價比高的模式生物制備服務。

  服務類型

        1、全身性基因敲除

        2、條件性敲除

        3、點突變

        4、小片段基因敲入

        5、雙/多基因敲除/敲入

    動物制備

          



    技術優勢

      1、我們已經具有10000多對CRISPR/Cas9系統構建和活性驗證的成功經驗。

      2、我們具有強大的技術支持團隊,可以為客戶提供免費專業的技術支持。

      3、我們已經成功使用CRISPR/Cas9系統為客戶提供了數千例成功案例,包括小鼠、大鼠、家蠶、斑馬魚等突變體,至今未曾失敗過,我們的服務受到了客戶的一致認可。

      4、價格低、周期短。


    服務流程和周期

    具體流程

    1、CRISPR/Cas9技術獲得的基因敲除鼠,由于是在大鼠或者小鼠的鼠原核受精卵期進行的修飾,獲得的F0鼠一般也是雜合子,并且每只FO鼠由于移碼突變情況可能不一樣,所以每只F0鼠也需要作為一個獨立的譜系進行傳代;

    2、原核顯微注射獲得測序鑒定陽性的F0代雜合子鼠,F0代雜合子鼠與野生型鼠進行交配,獲得測序鑒定陽性的F1代雜合子鼠(可能有多種突變類型的F1);


    3、選擇來自同一只F0代鼠,突變類型一致的F1代鼠,達到性成熟后與進行同胞交配,可獲得F2代鼠。對交配獲得的F2代鼠進行PCR及測序鑒定,理論上, F2代鼠中25%為相同突變型的純合子鼠,有50%為只有一條染色體突變的雜合子鼠,有25%為野生型鼠。

    參考文獻

    1、RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9 .Science. 2013 Feb 15 339(6121):823-6.

    2、Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems. Science. 2013 Feb 15 339(6121):819-23.