细菌基因组完成图真菌基因组完成图微生物群落多样性宏基因组测序服务全长转录组测序第三代测序服务非靶向代谢组学靶向代谢组学脂质组学离子组学脂肪酸检测氨基酸检测代谢组学服务定量蛋白质组服务双向电泳服务修饰蛋白质组蛋白质芯片蛋白质谱鉴定蛋白互作检测Western Blot蛋白质组学服务高通量测序数据分析蛋白质组学数据分析代谢组学数据分析芯片数据分析GO/Pathway富集分析相关性和聚类分析共表达网络图靶基因预测调控网络图蛋白相互作用网络图生物信息学服务CRISPR/Cas9载体构建稳定细胞系构建服务模式生物制备服务CRISPR/Cas9技术服务甲基化测序服务甲基化芯片服务甲基化验证服务DNA甲基化服务lncRNA测序服务lncRNA芯片服务lncRNA定量PCR验证lncRNA过表达服务lncRNA抑制服务lncRNA技术服务miRNA测序服务miRNA芯片服务miRNA定量PCR验证miRNA过表达服务miRNA抑制服务miRNA靶基因验证服务miRNA技术服务环状RNA测序服务环状RNA芯片服务环状RNA定量PCR验证环状RNA过表达服务环状RNA抑制服务环状RNA技术服务转录组测序服务表达谱测序服务mRNA/lncRNA/环状RNA 三合一芯片表达谱芯片服务荧光定量PCR验证mRNA过表达服务mRNA抑制服务mRNA技术服务转录因子筛选服务抗体制备服务ChiP-Seq测序服务ChiP-qPCR技术服务EMSA技术服务luciferase 实验服务转录因子技术服务mRNA定量PCR检测miRNA定量PCR检测lncRNA定量PCR检测环状RNA定量PCR检测DNA拷贝数检测相对定量PCR服务绝对定量PCR服务荧光定量PCR服务整体课题服务SNP分型检测服务SSR/STR技术服务病毒包装服务CRISPR/Cas9技术试剂miRNA功能研究试剂lncRNA功能研究试剂环状RNA功能研究试剂mRNA功能研究试剂发表文献样品准备服务流程基金申请
模式动物制备服务
服务详情

  简介

      在Science2013年1,3月)的两篇文章,证明Cas9系统能在293T、K562、iPS等多种细胞中,进行有效的靶向酶切,非同源重组(NHEJ)、同源重组 (HR)效率在3-25%之间,与TALEN酶切效果相当。文章还证明,多个靶点可以同时进行靶向酶切。这些工作将进一步靶向基因操纵推向高潮,使得多个基因敲除、敲入变得更为简单、高效。虽然目前,大家对该技术的特异性,免疫原性还了解甚少,但是随着研究的不断深入,一定会有很大的改善。在未来的2-3年,动植物育种、干细胞定向分化、遗传疾定点修复等等都将得到迅猛的发展。

  言行生物拥有成熟高效的CRISPR/Cas9及TALEN基因敲除技术平台,完善的模式生物构建流程平台,完美整从载体设计、构建、活性鉴定、基因突变动物模型建立等各个环节。现推出小鼠、大鼠、猪、斑马鱼等模式生物基因敲除/敲入技术服务,为客户提供周期短、性价比高的模式生物制备服务。

  服务类型

        1、全身性基因敲除

        2、条件性敲除

        3、点突变

        4、小片段基因敲入

        5、双/多基因敲除/敲入

    动物制备

          



    技术优势

      1、我们已经具有10000多对CRISPR/Cas9系统构建和活性验证的成功经验。

      2、我们具有强大的技术支持团队,可以为客户提供免费专业的技术支持。

      3、我们已经成功使用CRISPR/Cas9系统为客户提供了数千例成功案例,包括小鼠、大鼠、家蚕、斑马鱼等突变体,至今未曾失败过,我们的服务受到了客户的一致认可。

      4、价格低、周期短。


    服务流程和周期

    具体流程

    1、CRISPR/Cas9技术获得的基因敲除鼠,由于是在大鼠或者小鼠的鼠原核受精卵期进行的修饰,获得的F0鼠一般也是杂合子,并且每只FO鼠由于移码突变情况可能不一样,所以每只F0鼠也需要作为一个独立的谱系进行传代;

    2、原核显微注射获得测序鉴定阳性的F0代杂合子鼠,F0代杂合子鼠与野生型鼠进行交配,获得测序鉴定阳性的F1代杂合子鼠(可能有多种突变类型的F1);


    3、选择来自同一只F0代鼠,突变类型一致的F1代鼠,达到性成熟后与进行同胞交配,可获得F2代鼠。对交配获得的F2代鼠进行PCR及测序鉴定,理论上, F2代鼠中25%为相同突变型的纯合子鼠,有50%为只有一条染色体突变的杂合子鼠,有25%为野生型鼠。

    参考文献

    1、RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9 .Science. 2013 Feb 15 339(6121):823-6.

    2、Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems. Science. 2013 Feb 15 339(6121):819-23.