細菌基因組完成圖真菌基因組完成圖微生物群落多樣性宏基因組測序服務全長轉錄組測序第三代測序服務非靶向代謝組學靶向代謝組學脂質組學離子組學脂肪酸檢測氨基酸檢測代謝組學服務定量蛋白質組服務雙向電泳服務修飾蛋白質組蛋白質芯片蛋白質譜鑒定蛋白互作檢測Western Blot蛋白質組學服務高通量測序數據分析蛋白質組學數據分析代謝組學數據分析芯片數據分析GO/Pathway富集分析相關性和聚類分析共表達網絡圖靶基因預測調控網絡圖蛋白相互作用網絡圖生物信息學服務CRISPR/Cas9載體構建穩定細胞系構建服務模式生物制備服務CRISPR/Cas9技術服務甲基化測序服務甲基化芯片服務甲基化驗證服務DNA甲基化服務lncRNA測序服務lncRNA芯片服務lncRNA定量PCR驗證lncRNA過表達服務lncRNA抑制服務lncRNA技術服務miRNA測序服務miRNA芯片服務miRNA定量PCR驗證miRNA過表達服務miRNA抑制服務miRNA靶基因驗證服務miRNA技術服務環狀RNA測序服務環狀RNA芯片服務環狀RNA定量PCR驗證環狀RNA過表達服務環狀RNA抑制服務環狀RNA技術服務轉錄組測序服務表達譜測序服務mRNA/lncRNA/環狀RNA 三合一芯片表達譜芯片服務熒光定量PCR驗證mRNA過表達服務mRNA抑制服務mRNA技術服務轉錄因子篩選服務抗體制備服務ChiP-Seq測序服務ChiP-qPCR技術服務EMSA技術服務luciferase 實驗服務轉錄因子技術服務mRNA定量PCR檢測miRNA定量PCR檢測lncRNA定量PCR檢測環狀RNA定量PCR檢測DNA拷貝數檢測相對定量PCR服務絕對定量PCR服務熒光定量PCR服務整體課題服務SNP分型檢測服務SSR/STR技術服務病毒包裝服務CRISPR/Cas9技術試劑miRNA功能研究試劑lncRNA功能研究試劑環狀RNA功能研究試劑mRNA功能研究試劑發表文獻樣品準備服務流程基金申請
Western Blot服務
服務詳情

服務簡介

    Western Blot中文一般稱為蛋白質印跡。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品提出的蛋白進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表達情況的信息。

     Western Blot與Southern印跡雜交Northern印跡雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過SDS-page電泳分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素膜NC膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與同位素記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。

服務內容

1、常規SDS-PAGE Western,即1D-Western blot,就是以上介紹的最常用的Western blot。

2、雙向電泳Western,即2D-Western blot,這是SDS-page Western的升級方法,將蛋白樣品經過2D(雙向電泳)分離后,再利用特異抗體進行Western blot??商剿髂掣隹固迥蓯侗鵡男┑鞍卓乖?;可考察某個抗體的特異性是否良好;可檢測某種特定修飾狀態的蛋白的表達水平。

3、IP 或Co-IP Western blot,免疫沉淀(IP)或免疫共沉淀(Co-IP)和Western blot結合是研究蛋白相互作用或蛋白復合物的有力工具。若想鑒定某種蛋白是否和A蛋白相互作用,則可以利用A蛋白的特異蛋白進行免疫共沉淀(Co-IP),將所有與A蛋白相互作用的蛋白混合物富集下來,再混合物進行SDS-page Western,即可驗證。


服務結果

A、Western blot 檢測的試劑耗材、儀器設備、操作過程。

B、蛋白上樣濃度、上樣量一份;

C、標記好的曝光膠片、膠片掃描圖;

D、各條帶灰度分析報告

結果示例

1、SDS-PAGE圖片

2、SDS-PAGE Western Blot圖片

3、2D-Western blot圖片

樣品要求

A、對于常規Western blot檢測,組織100mg以上、細胞數量10的6次方以上,新鮮或冷凍保存;

  B、對于2D Western blot檢測,咨詢業務員;