细菌基因组完成图真菌基因组完成图微生物群落多样性宏基因组测序服务全长转录组测序第三代测序服务非靶向代谢组学靶向代谢组学脂质组学离子组学脂肪酸检测氨基酸检测代谢组学服务定量蛋白质组服务双向电泳服务修饰蛋白质组蛋白质芯片蛋白质谱鉴定蛋白互作检测Western Blot蛋白质组学服务高通量测序数据分析蛋白质组学数据分析代谢组学数据分析芯片数据分析GO/Pathway富集分析相关性和聚类分析共表达网络图靶基因预测调控网络图蛋白相互作用网络图生物信息学服务CRISPR/Cas9载体构建稳定细胞系构建服务模式生物制备服务CRISPR/Cas9技术服务甲基化测序服务甲基化芯片服务甲基化验证服务DNA甲基化服务lncRNA测序服务lncRNA芯片服务lncRNA定量PCR验证lncRNA过表达服务lncRNA抑制服务lncRNA技术服务miRNA测序服务miRNA芯片服务miRNA定量PCR验证miRNA过表达服务miRNA抑制服务miRNA靶基因验证服务miRNA技术服务环状RNA测序服务环状RNA芯片服务环状RNA定量PCR验证环状RNA过表达服务环状RNA抑制服务环状RNA技术服务转录组测序服务表达谱测序服务mRNA/lncRNA/环状RNA 三合一芯片表达谱芯片服务荧光定量PCR验证mRNA过表达服务mRNA抑制服务mRNA技术服务转录因子筛选服务抗体制备服务ChiP-Seq测序服务ChiP-qPCR技术服务EMSA技术服务luciferase 实验服务转录因子技术服务mRNA定量PCR检测miRNA定量PCR检测lncRNA定量PCR检测环状RNA定量PCR检测DNA拷贝数检测相对定量PCR服务绝对定量PCR服务荧光定量PCR服务整体课题服务SNP分型检测服务SSR/STR技术服务病毒包装服务CRISPR/Cas9技术试剂miRNA功能研究试剂lncRNA功能研究试剂环状RNA功能研究试剂mRNA功能研究试剂发表文献样品准备服务流程基金申请
miRNA功能研究相关试剂盒

    简介

        miRNA功能研究策略

     功能获得性研究gain-of-function可化学合成miRNA mimic、 miRNA agomir;或利用现成的miRNA前体过表达载体,也可根据需要进行定制。

     功能缺失性研究loss-of-function)化学合成miRNA inhibitor、miRNA antagomir、或利用现成的miRNA抑制剂表达载体,也可根据需要进行定制。


    1、miRNA过表达载体

      现货提供1700个人类、834个小鼠miRNA前体的各种表达载体。同时定制各种miRNA前体表达载体。

      采用基于猫免疫缺陷病慢病毒系统的载体骨架,构建了miRNA前体表达克隆。RNA聚合酶III型的H1启动子驱动转录前体miRNA的茎环前体(大约有150核苷酸长度)。 随后通过RNAi的酶系加工生成成熟的miRNA。在CMV启动子和双顺反子驱动下,共表达的报告基因eGFP和新霉素/嘌呤霉素筛选基因,可作为监测miRNA表达、转染和转化效率的参考标准。

    miRNA过表达载体

       

      特点:miRNA表达框已完全测序确证并经过优化,有利于前体miRNA在细胞中的表达和成熟; 非病毒和病毒表达载体,可转染普通细胞和难转染、未分化细胞,可进行瞬时或稳定表达;载体中包含的eGFP标签可以监测载体的转染或感染效率。


    2、miRNA mimic库和 miRNA agomir

      针对成熟miRNA序列特殊设计,运用化学方法合成的双链RNA,能模拟细胞中内源性成熟miRNA的高水平表达,以增强内源性miRNA的调控作用,进行功能获得性(gain-of-function)研究。只需直接转染进入细胞或动物,可瞬时/稳定表达,可检测功能变化,快速,方便。

      现货提供miRBase 21.0中人、小鼠、大鼠的 miRNA mimic/ miRNA agomir,并不断补充更新,其他物种需要定制。


    3、miRNA抑制剂表达载体

      现货提供miRBase 21.0 数据库中全部人、小鼠和大鼠性抑制剂表达载体。同时定制各种miRNA抑制剂表达载体。

    miRNA抑制剂表达载体


      特点:提供基于慢病毒或非病毒载体的miRNA抑制剂表达克隆 ,经过miRNA的特异严格的实验测试,保证能在大多数哺乳动物细胞中高水平表达,可瞬时或者稳定抑制miRNA,带有荧光蛋白报告基因便于转染后的细胞筛选。


    4、miRNA inhibitor库和miRNA antagomir

           miRNA inhibitor/antagomir是针对成熟miRNA序列,化学合成的miRNA抑制剂,通过特异性地与成熟miRNA分子结合而抑制其作用,可以削弱细胞中miRNA导致的基因沉默效应,进行短期或长期的miRNA功能缺失性(loss-of-function)研究。miRNA inhibitor只需用转染试剂包裹即可转染进入细胞;miRNA antagomir直接转入细胞或注射动物,持续作用6周。

      现货提供miRBase 21.0数据库中人、小鼠、大鼠的所有miRNA inhibitor/ miRNA antagomir,并不断补充更新,其他物种的miRNA inhibitor/ miRNA antagomir需定制。


    5、 miRNA 3' UTR 靶标克隆

           miRNA通过碱基互补配对的方式识别靶基因的3’UTR区,并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。因此,可以将目的基因的3’UTR区域构建到含luciferase的报告基因上,通过比较miRNA过表达或inhibitor 与报告基因作用检测荧光值的变化,判断miRNA对靶基因的作用。再通过对3’ UTR区进行定点突变的方法进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。

      现货提供人类23000个、小鼠19000个、大鼠8000个编码基因的3’UTR区报告基因载体,其他物种和基因可定制。原理图:  

    3’UTR区报告基因载体验证miRNA靶基因原理图