細菌基因組完成圖真菌基因組完成圖微生物群落多樣性宏基因組測序服務全長轉錄組測序第三代測序服務非靶向代謝組學靶向代謝組學脂質組學離子組學脂肪酸檢測氨基酸檢測代謝組學服務定量蛋白質組服務雙向電泳服務修飾蛋白質組蛋白質芯片蛋白質譜鑒定蛋白互作檢測Western Blot蛋白質組學服務高通量測序數據分析蛋白質組學數據分析代謝組學數據分析芯片數據分析GO/Pathway富集分析相關性和聚類分析共表達網絡圖靶基因預測調控網絡圖蛋白相互作用網絡圖生物信息學服務CRISPR/Cas9載體構建穩定細胞系構建服務模式生物制備服務CRISPR/Cas9技術服務甲基化測序服務甲基化芯片服務甲基化驗證服務DNA甲基化服務lncRNA測序服務lncRNA芯片服務lncRNA定量PCR驗證lncRNA過表達服務lncRNA抑制服務lncRNA技術服務miRNA測序服務miRNA芯片服務miRNA定量PCR驗證miRNA過表達服務miRNA抑制服務miRNA靶基因驗證服務miRNA技術服務環狀RNA測序服務環狀RNA芯片服務環狀RNA定量PCR驗證環狀RNA過表達服務環狀RNA抑制服務環狀RNA技術服務轉錄組測序服務表達譜測序服務mRNA/lncRNA/環狀RNA 三合一芯片表達譜芯片服務熒光定量PCR驗證mRNA過表達服務mRNA抑制服務mRNA技術服務轉錄因子篩選服務抗體制備服務ChiP-Seq測序服務ChiP-qPCR技術服務EMSA技術服務luciferase 實驗服務轉錄因子技術服務mRNA定量PCR檢測miRNA定量PCR檢測lncRNA定量PCR檢測環狀RNA定量PCR檢測DNA拷貝數檢測相對定量PCR服務絕對定量PCR服務熒光定量PCR服務整體課題服務SNP分型檢測服務SSR/STR技術服務病毒包裝服務CRISPR/Cas9技術試劑miRNA功能研究試劑lncRNA功能研究試劑環狀RNA功能研究試劑mRNA功能研究試劑發表文獻樣品準備服務流程基金申請
miRNA功能研究相關試劑盒

    簡介

        miRNA功能研究策略

     功能獲得性研究gain-of-function可化學合成miRNA mimic、 miRNA agomir;或利用現成的miRNA前體過表達載體,也可根據需要進行定制。

     功能缺失性研究loss-of-function)化學合成miRNA inhibitor、miRNA antagomir、或利用現成的miRNA抑制劑表達載體,也可根據需要進行定制。


    1、miRNA過表達載體

      現貨提供1700個人類、834個小鼠miRNA前體的各種表達載體。同時定制各種miRNA前體表達載體。

      采用基于貓免疫缺陷病慢病毒系統的載體骨架,構建了miRNA前體表達克隆。RNA聚合酶III型的H1啟動子驅動轉錄前體miRNA的莖環前體(大約有150核苷酸長度)。 隨后通過RNAi的酶系加工生成成熟的miRNA。在CMV啟動子和雙順反子驅動下,共表達的報告基因eGFP和新霉素/嘌呤霉素篩選基因,可作為監測miRNA表達、轉染和轉化效率的參考標準。

    miRNA過表達載體

       

      特點:miRNA表達框已完全測序確證并經過優化,有利于前體miRNA在細胞中的表達和成熟; 非病毒和病毒表達載體,可轉染普通細胞和難轉染、未分化細胞,可進行瞬時或穩定表達;載體中包含的eGFP標簽可以監測載體的轉染或感染效率。


    2、miRNA mimic庫和 miRNA agomir

      針對成熟miRNA序列特殊設計,運用化學方法合成的雙鏈RNA,能模擬細胞中內源性成熟miRNA的高水平表達,以增強內源性miRNA的調控作用,進行功能獲得性(gain-of-function)研究。只需直接轉染進入細胞或動物,可瞬時/穩定表達,可檢測功能變化,快速,方便。

      現貨提供miRBase 21.0中人、小鼠、大鼠的 miRNA mimic/ miRNA agomir,并不斷補充更新,其他物種需要定制。


    3、miRNA抑制劑表達載體

      現貨提供miRBase 21.0 數據庫中全部人、小鼠和大鼠性抑制劑表達載體。同時定制各種miRNA抑制劑表達載體。

    miRNA抑制劑表達載體


      特點:提供基于慢病毒或非病毒載體的miRNA抑制劑表達克隆 ,經過miRNA的特異嚴格的實驗測試,保證能在大多數哺乳動物細胞中高水平表達,可瞬時或者穩定抑制miRNA,帶有熒光蛋白報告基因便于轉染后的細胞篩選。


    4、miRNA inhibitor庫和miRNA antagomir

           miRNA inhibitor/antagomir是針對成熟miRNA序列,化學合成的miRNA抑制劑,通過特異性地與成熟miRNA分子結合而抑制其作用,可以削弱細胞中miRNA導致的基因沉默效應,進行短期或長期的miRNA功能缺失性(loss-of-function)研究。miRNA inhibitor只需用轉染試劑包裹即可轉染進入細胞;miRNA antagomir直接轉入細胞或注射動物,持續作用6周。

      現貨提供miRBase 21.0數據庫中人、小鼠、大鼠的所有miRNA inhibitor/ miRNA antagomir,并不斷補充更新,其他物種的miRNA inhibitor/ miRNA antagomir需定制。


    5、 miRNA 3' UTR 靶標克隆

           miRNA通過堿基互補配對的方式識別靶基因的3’UTR區,并根據互補程度的不同指導沉默復合體降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。因此,可以將目的基因的3’UTR區域構建到含luciferase的報告基因上,通過比較miRNA過表達或inhibitor 與報告基因作用檢測熒光值的變化,判斷miRNA對靶基因的作用。再通過對3’ UTR區進行定點突變的方法進一步確定miRNA與靶基因3’UTR的作用位點。

      現貨提供人類23000個、小鼠19000個、大鼠8000個編碼基因的3’UTR區報告基因載體,其他物種和基因可定制。原理圖:  

    3’UTR區報告基因載體驗證miRNA靶基因原理圖